空腸彎曲菌（Campylobacter jejuni）是一種可以引起人類急性腸炎和食物中毒的人畜共患病原菌。該菌培養條件苛刻，生長需要特定的環境，菌株不易保存。通常在微需氧（5%氧氣、85%氮氣、10%二氧化碳）、42±1℃環境下，可存活4～5d，最后因培養基表面干燥而導致菌體干燥死亡。

一、空腸彎曲菌的活化方法

1.配制彎曲菌活化肉湯

a. 將各成分溶于蒸餾水中，經過0.22μm濾膜過濾除菌。FBP 根據需要量現用現配，在-70℃儲存不超過3個月或-20℃儲存不超過1個月。

b. 裂解脫纖維羊血提前從-70℃冰箱取出恢復至室溫。

c. 稱取CM125布氏肉湯并溶解滅菌，滅菌后冷卻至室溫。每100ml基礎加入5ml裂解脫纖維羊血和0.5ml FBP溶液，分裝試管，即制備完成。

2.肉湯培養

從-70℃冰箱取出彎曲菌凍存甘油管，傾倒至彎曲菌活化肉湯中。置于厭氧培養罐中，加入微需氧產氣袋于42℃培養24h。

3.平板培養

取10ul肉湯培養物劃線至哥倫比亞血平板（PB003A），42℃微需氧培養44±4h，觀察菌落形態。典型菌落為灰色、扁平、濕潤有光澤，呈沿接種線向外擴散的傾向。

4、菌株驗證

通過菌落形態和生化實驗對菌株進行驗證，確認后進行菌株保藏。

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二、空腸彎曲菌的保藏方法

1.雙倍布氏肉湯甘油保存管制作：稱取5.62g CM125布氏肉湯干粉，溶于70ml蒸餾水、30ml甘油中，滅菌后冷卻至室溫，加入5ml裂解脫纖維羊血、0.5ml FBP溶液，混勻后分裝到凍存管中，每管1ml。

2.?使用接種環刮取哥倫比亞血平板上的純菌落（盡可能多）至凍存管中，渦旋震蕩5s，于-70℃長期保存。

三、注意事項